非梗阻性无精子症男性萎缩性曲细精管内的支持细胞和生殖细胞

背景： 患有非梗阻性无精症（NOA）的不育男性的精子发生受损。这些患者的睾丸中经常存在扩张和未扩张的萎缩性生精小管，扩张的小管中活跃的精子发生的可能性最高。对于未扩张的肾小管知之甚少，而在 NOA 患者中，未扩张的肾小管占大多数。为了改进手术取精失败的 NOA 男性的治疗策略，我们的目的是描述萎缩性未扩张小管中精原干细胞微环境的特征。

方法： 从 34 名患者的未扩张区域获取约 3x3x3 mm 3 的睾丸活检组织。他们被分类为生精不足 (HS) (n=5)、成熟停滞 (MA) (n=14) 和仅支持细胞 (SCO) (n=15)。来自五名有生育能力的男性的睾丸样本被纳入作为对照。活检用于组织学分析、RT-PCR 分析以及生殖细胞和支持细胞标记物的免疫荧光。

结果： 与对照相比，所有三种 NOA 亚型的未扩张肾小管中抗苗勒氏管激素 mRNA 和蛋白质表达均增加，显示支持细胞的不成熟状态（p<0.05）。MA中GDNF mRNA表达显着增加（P =0.0003）。BMP4 mRNA 表达量在 HS、MA 和 SCO 中显着增加（P =0.02，P =0.0005，P=0.02，分别）。与对照组相比，SCO-NOA 中的肾小管壁厚度增加了 2.2 倍（p<0.05）。在生殖细胞中，我们发现 NOA 中的 DEAD-box 解旋酶 4 (DDX4) 和黑色素瘤相关抗原 A4 (MAGE-A4) mRNA 和蛋白表达降低（MAGE-A：HS 降低 46%，MA 降低 53%， SCO 中缺席）。在 HS-NOA 中，雄激素受体阳性支持细胞的数量减少了 30%，mRNA 表达模式相似。与 HS 和 MA 相比，SCO 中 γH2AX 表达增加。然而，这些差异均未达到统计显着性，可能是由于样本数量较少。

结论： 三种 NOA 亚型的未扩张肾小管中支持细胞未成熟。SCO 中支持细胞中 DNA 损伤的增加和肾小管壁变厚表明从 SCO 到 HS 和 MA 缺乏精子发生的不同机制。这些结果加深了对不同类型 NOA 患者未扩张肾小管差异的了解。