Epac 激活诱导细胞外 Ca 2+独立的 Ca 2+波，从而触发人类精子顶体反应

 细胞内第二信使cAMP和Ca 2+ 的信号通路在人类精子的众多生理过程中发挥着至关重要的作用。其中一个过程是顶体反应（AR），它是精子穿过卵子包膜并暴露融合膜以实现卵子与精子融合所必需的。黄体酮和透明带引起细胞内 Ca 2+增加，这是哺乳动物精子中 AR 所需的。这种增加是由初始 Ca 2+流入介导的，但也由细胞内 Ca 2+储存的释放介导。众所周知，细胞内 Ca 2+储存在 [Ca 2+ 的调节] 中发挥着核心作用。2+ ] i并产生复杂的Ca 2+信号，例如振荡和波。在人类精子中，有人提出 Epac 的 cAMP 类似物和特异性激动剂 8-(对氯苯硫基)-2'-O-甲基腺苷-3',5'-环单磷酸 (2'-O-Me-cAMP ) 引起AR 中涉及的 细胞内 Ca 2+释放。

目的： 鉴定参与人精子中2'-O-Me-cAMP 触发的Ca 2+动员的分子实体。

材料和方法： 在获能的人类精子中，我们在无 Ca 2+培养基中使用 Fluo 3-AM 和 FM4-64 实时监测 Ca 2+动力学和 AR 的发生。

结果： 2'-O-Me-cAMP 激活 Epac 诱导 Ca 2+波，该波从中段开始传播到顶体区域。这种 Ca 2+反应对鱼藤酮、CGP、xestospongin、NED-19 和毒胡萝卜素敏感，表明不同离子转运蛋白（线粒体复合物 I 和 Na + /Ca 2+交换器、肌醇 3-磷酸受体、双孔）的参与通道和内部储存 Ca 2+ -ATP酶）。

讨论： 我们的结果表明，Epac 激活促进三种不同的细胞内 Ca 2+库 之间的动态串扰：线粒体、冗余核膜和顶体。